western blot壓片

標題Re: [求救]Western blot壓片問題. 時間Fri May 1 17:18:53 2009. ※ 引述《yuching23 (青)》之銘言: : 不知有沒有人碰過, : 加入ECL後整片PVDF membrance都呈現螢光...

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標題Re: [求救]Western blot壓片問題. 時間Fri May 1 17:18:53 2009. ※ 引述《yuching23 (青)》之銘言: : 不知有沒有人碰過, : 加入ECL後整片PVDF membrance都呈現螢光反應, : 壓出來當然就一片黑~~~ : 該怎麼處理呢?? : 之前加的一抗都沒有這種問題, : 但最近在測另一種一抗就出現這問題....... 我之前也遇到一樣的問題,不過我的是 ... ,Western blot. 說到western 我們實驗室說二沒人敢說一 我們實驗室就是以western起家的 跑出來的band也是出名的漂亮 發paper的量也是長庚出了名的多 方法也都是經過將近二十年漸漸set up起來 這其中也包括許多的酸甜苦澀成長史 每個星期一個人至少跑三次western 一組八片玻璃 算一算組Hoefer玻璃大概花二十分 作膠快的話 ...

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Re: [問題] western blot 壓片的問題.. - 看板Biotech - 批踢踢實業坊

看板Biotech. 標題Re: [問題] western blot 壓片的問題.. 時間Fri Jul 21 13:59:48 2006. ※ 引述《linker0726 (試著獨立)》之銘言: : ※ 引述《threestars (等待)》之銘言: : : 最近一直在押ERK : : 你問的是protein的ERK1/2 還是phospho-ERK : : ERK量比較少本來是要壓久一點但20...

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Re: [求救]Western blot壓片問題- 看板Biotech - 批踢踢實業坊

標題Re: [求救]Western blot壓片問題. 時間Fri May 1 17:18:53 2009. ※ 引述《yuching23 (青)》之銘言: : 不知有沒有人碰過, : 加入ECL後整片PVDF membrance都呈現螢光反應, : 壓出來當然就一片黑~~~ : 該怎麼處理呢?? : 之前加的一抗都沒有這種問題, : 但最近在測另一種一抗就出現這問題....... 我之前也遇到一...

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Western blot @ 離開心更寬:: 痞客邦:: - 痞客邦PIXNET

Western blot. 說到western 我們實驗室說二沒人敢說一 我們實驗室就是以western起家的 跑出來的band也是出名的漂亮 發paper的量也是長庚出了名的多 方法也都是經過將近二十年漸漸set up起來 這其中也包括許多的酸甜苦澀成長史 每個星期一個人至少跑三次western 一組八片玻璃 算一算組Hoefer玻璃大概花二十分 作膠快的話 ...

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Western Blot 疑難雜症大解密

卻沒有測試過最佳抗體作用濃度,便發生壓片呈色結果不佳的狀況。下圖(左) 就是在相同電泳以及西方墨點條. Western Blot (西方墨點法) 已是. 現在最常見到的研究驗証方法學,它. 乃是結合膠體電泳的解析和免疫專一. 性所發展出來的偵測特定蛋白表現的. 方法。利用西方墨點法,不僅可利用. 抗原抗體結合的專一性 ...

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Western blot常見問題- 每日頭條

最好還是不要同時加兩種一抗。因為如果結果裡面有非特異信號的話,就說不清楚了。做Western在同一張膜上檢測目的蛋白和內對照,也是先上目的蛋白的一抗、二抗,ECL顯色、壓片、洗片;漂洗以後,再上內對照的一抗、二抗,ECL顯色、壓片、洗片。 4、Western blot 使用的膜哪種最好啊,PVDF好還是NC膜,如何 ...

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Western blot底片感光(壓片)技術@ 經驗,心得,突發奇想及分享:: 隨意窩 ...

在實驗室已經邁入10個年頭,其中最常接觸的實驗技術應該就是Western blot了吧。有鑑於許多學弟妹經常在底片感光技術上遇到許多麻煩和困難,所以這篇把底片感光時最常遇到的情形及問題整理一下,讓大家參考看看。有時為了得到一張可以放在論文上秀給大家看的Western blot圖,甚至花了一兩個月的時間也壓不出好片子,或是 ...

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[求救] western blot問題- 看板Biotech - 批踢踢實業坊

ECL作用數秒~3min後壓片二抗的部分有洗過1hr.2hr.3hr 但是都沒有壓出來壓片的問題大部分是壓不出來不過也有遇過幾次黑片的狀況抗體廠牌... 一抗大部分是R&D system,少部分是santa cruz 二抗是santa cruz (之前爬文santa的抗體好像有點恩...Orz) 另外,想順便問一下Ponceau S有沒有哪一家比較便宜阿.

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[求救] western blot壓出空白片- 看板Biotech - 批踢踢實業坊

我最近在做western blot 我大學到研究所期間都做過western blot 都有做出結果現在到其他實驗室做WB卻做不出來實驗室的人幾乎都做過WB.

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常見六大問題

低背景值,不用再重新壓片或重跑WB。 原因3:過度曝光. Blocking 在Western blot 的過程中扮演了實驗成敗的關鍵角色,但是有許多研究人員因為價格便宜的關係,. 習慣使用脫脂奶粉,但是脫脂奶粉中的成分相當複雜,其中所含的biotin很容易造成高背景值的產生,尤其要. 避免應用在avidin-biotin 的緩衝液系統。此外,抗體也可能會 ...

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獻給初學者:western blot 操作步驟詳解- 壹讀

蛋白質的樣品製備是Western Blotting 的第一步,樣品製備是關鍵步驟,要求儘可能的獲得所有蛋白質,應注意以下問題: ..... 片夾,把X-光片放在膜上,一旦放上,便不能移動,關上X-光片夾,開始計時;根據信號的強弱適當調整曝光時間,一般為1 min 到2 min,也可選擇不同時間多次壓片,以達最佳效果(也有人重疊壓 ...

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